C*******e
发帖数: 4348 | 1 如题
Phusion Hot Start II和Herculase II该选哪个？
还是PCR的问题
Pfu Ultra II、Taq一开始都扩不出来
后来发现是模板的序列跟我们手上的序列不一致
现在根据测序结果设计了引物
Pfu Ultra II只有非特异产物出来
目的片段不算多大，4kb不到
GC含量也没有特别高，60%而已
一般的优化都试过了
现在老板支持买别的酶试试
大家说选哪个？ |
h******e
发帖数: 897 | 2 4kb的话用Platinum PCR Supermix (Invitrogen)应该没问题
【在 C*******e 的大作中提到】
: 如题
: Phusion Hot Start II和Herculase II该选哪个？
: 还是PCR的问题
: Pfu Ultra II、Taq一开始都扩不出来
: 后来发现是模板的序列跟我们手上的序列不一致
: 现在根据测序结果设计了引物
: Pfu Ultra II只有非特异产物出来
: 目的片段不算多大，4kb不到
: GC含量也没有特别高，60%而已
: 一般的优化都试过了
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C*******e
发帖数: 4348 | 3 不是长短的问题...
如果phusion hot start II和herculase II两个里面选一个呢？
选哪个
有哪位用过的xdjm来说说？
【在 h******e 的大作中提到】
: 4kb的话用Platinum PCR Supermix (Invitrogen)应该没问题
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s******s
发帖数: 13035 | 4 Invitrogen Platium HIFI Taq
【在 C*******e 的大作中提到】
: 不是长短的问题...
: 如果phusion hot start II和herculase II两个里面选一个呢？
: 选哪个
: 有哪位用过的xdjm来说说？
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C*******e
发帖数: 4348 | 5 这个酶有什么特别之处么？
去Invitrogen网站上查了，可没有强调对于high GC%或者难扩增的序列有什么优势
相反我要二选一的两个酶，Herculase II和Phusion Hot Start II至少是号称可以扩增
难扩的序
列的
【在 s******s 的大作中提到】
: Invitrogen Platium HIFI Taq
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