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Biology版 - 请教一下鸡胚脊髓显微注射电转,质粒CMV promoter工作不工作
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B******s
发帖数: 3
1
最近尝试在鸡胚脊髓电转质粒来表达外源蛋白,用了pcDNA3.1的vector没看到蛋白表达
(CMV promoter,GFP tag),阳性对照用了另一个载体表达GFP看到很强的表达(另一
种promoter),有没有达人知道CMV promoter在鸡胚脊髓电转工作不工作,效率咋样?
多谢您的回复和帮助
a****d
发帖数: 1919
2
CMV is relatively weak. CAG/PKA/ubiquitin promoter should all work in ovo
eletroporation.
r***e
发帖数: 2539
3
cmv一点都不弱,除非在胚胎中被silence掉了。

【在 a****d 的大作中提到】
: CMV is relatively weak. CAG/PKA/ubiquitin promoter should all work in ovo
: eletroporation.

B******s
发帖数: 3
4
多谢,那我换个载体试一试

【在 a****d 的大作中提到】
: CMV is relatively weak. CAG/PKA/ubiquitin promoter should all work in ovo
: eletroporation.

B******s
发帖数: 3
5
请问在胚胎中被silence掉是啥意思呢?我的质粒转染293细胞就发现荧光就比较弱,说
明这个克隆蛋白表达水平比较低,所以我担心CMV在鸡胚里表达不好使得我彻底看不到
荧光了。

【在 r***e 的大作中提到】
: cmv一点都不弱,除非在胚胎中被silence掉了。
l***y
发帖数: 638
6
CMV是一波流,开始很强但是表达量降的很快
另外在293里用它表达荧光蛋白都是巨亮,是不是你要表达的东西对细胞有毒性【 在
Brussels (布鲁大神棍) 的大作中提到: 】
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