问下Baculovirius感染的Sf9细胞症状的问题 - Biology版 - 未名存档

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Biology版 - 问下Baculovirius感染的Sf9细胞症状的问题

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相关话题的讨论汇总
话题: 细胞话题: 感染话题: bacmid话题: 转染

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m*********r 发帖数: 49	1 最近在用invitrogen的bac to bac做表达，gene克隆到bacmid了之后，现在在转染（ transfection, 不知道翻译准不准）。前一次做的感染细胞放了一星期，monolayer都要100%了，还没死，怀疑感染效率低。现在试第二次，已经转染后72-96小时了，发现转染了bacmid的细胞除了长得比不加bacmid的对照长的慢点，好像很难看出来 invitrogen册子上说的细胞变大，出芽（这个我尤其难分辨）什么的（我平时也就用 200X inverted microscope观察），大家有比较明显的感染细胞和不感染细胞的对照图推荐我瞧瞧么？我不想一直等到细胞dislodge了，或者裂解了才能知道感染成功没有。
B****m 发帖数: 63	2 转染后状态改变不大。如果不确定的话，可以先表达GFP试试。另外我的一个小tip：提bacmid的时候不需要用公司的盒子，提质粒的碱裂解法效果很好。提取过程中动作轻柔点就行。
m*********r 发帖数: 49	3 多谢回复，我这次准备感染后120小时后把上清提了测下titer，不理想的话下次试试你说的tip看能不能提高感染效率。【在 B****m 的大作中提到】 : 转染后状态改变不大。 : 如果不确定的话，可以先表达GFP试试。 : 另外我的一个小tip：提bacmid的时候不需要用公司的盒子，提质粒的碱裂解法效果很 : 好。提取过程中动作轻柔点就行。

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