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Biology版 - 诱导型lentivirus shRNA为何没有产病毒?
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话题: shrna话题: 病毒话题: lentivirus话题: 诱导型话题: 包装
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e*******c
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1
最近用了invitrogene的pLKO-Tet-On诱导系统做shRNA, 用VsVg和Delta8.9做包装,
但就是不能产生病毒,或病毒低度基本测不到, 那位大虾用过此系统, 难道不能用
Vsvg包装体系而必须买他们自己的viralpower系统?
谢谢
j********r
发帖数: 156
2
we used lots of the named vector, but are you sure they are from invitrogen?
I think it was developed by people at Novartis, and can be available from
addgene.
r***e
发帖数: 2539
3
包装病毒一定要搞清楚你的vector上几代系统,包装质粒包括哪些元件。弄不出病毒是
小事,弄出wt HIV就麻烦了,据说taxas一个地方出过这个事故。
你这个两个质粒的系统应该是二代包装系统吧?请懂病毒载体的人帮你看一下,或者问
invitrogene的客服,他们的系统应该是三代的。

【在 e*******c 的大作中提到】
: 最近用了invitrogene的pLKO-Tet-On诱导系统做shRNA, 用VsVg和Delta8.9做包装,
: 但就是不能产生病毒,或病毒低度基本测不到, 那位大虾用过此系统, 难道不能用
: Vsvg包装体系而必须买他们自己的viralpower系统?
: 谢谢

F********1
发帖数: 272
4
这两个包装质粒,连同你的pLKO目标质粒,肯定是可以包装出lentivirus的。三者的比
例很重要,293T细胞的状态也非常重要。你的pLKO上有GFP吗?你怎么知道的没产生病
毒?
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也问牛牛们关于lentivirus表达蛋白求教:哪个inducible lentiviral shRNA system 比较好?
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mini-prep提取的质粒用于lentivirus制备靠谱么?有人用过Tet-pLKO-puro (shRNA vector)做 inducible protein overexpression 吗?
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