l******o
发帖数: 103 | 1 四年的phd，今天数数做了近70个clones了，mutate来mutate去。
最近遇到一巨大plasmid，要在一点引入突变，
要想得到正确的质粒，得弄3个intermediate plasmids，
今天回来的测序结果还不对，还得返工。
so frustrated！
project每前进一步就得准备这种，
这种project真揪心啊！ |
l******g
发帖数: 1623 | 2 这就是life
没怎么懂
我会先在intermediate plasmid 里面confirm mutation, 再组装巨大的
【在 l******o 的大作中提到】
: 四年的phd，今天数数做了近70个clones了，mutate来mutate去。
: 最近遇到一巨大plasmid，要在一点引入突变，
: 要想得到正确的质粒，得弄3个intermediate plasmids，
: 今天回来的测序结果还不对，还得返工。
: so frustrated！
: project每前进一步就得准备这种，
: 这种project真揪心啊！
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m******5
发帖数: 1383 | 3 如果真的是大plasmid，不知道有多大……如果有15+ k楼主还不如把小片段突变完再连
回去反而比这个快
甚至Gblock一段小片段 |
h***e
发帖数: 146 | 4 life is unfair
我的-80stock culture 有 12个boxes啦 |
z*******o
发帖数: 1794 | 5 还好还好，你只要最后确定这些都能用上就行。
想当年一年内风风火火的搞了47个vector，什么体内体外实验一大堆，后来发现那个
project从一开始就是错的，等于白玩，一盒子的构建就放在－80永远不见常温了。
【在 l******o 的大作中提到】
: 四年的phd，今天数数做了近70个clones了，mutate来mutate去。
: 最近遇到一巨大plasmid，要在一点引入突变，
: 要想得到正确的质粒，得弄3个intermediate plasmids，
: 今天回来的测序结果还不对，还得返工。
: so frustrated！
: project每前进一步就得准备这种，
: 这种project真揪心啊！
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N2
发帖数: 81 | 6 ask some company to do that, it is not that expective |
