r**o 发帖数: 212 | 1 细胞培养用的是Sigma的牛胰岛素(insulin solution from bovine pancreas),但是
现在Sigma缺货,backoeder不知道什么时候才能到货。转用Sigma的合成胰岛素(
recombinant from Saccharomyces cerevisiae),细胞生长状态变差,出现凋亡状态。
多次从冷冻管活化,生长不到一周又会变差。
求教:不同来源的胰岛素对细胞生长影响那么大么?
有无其他公司售卖的牛胰岛素?
或者用Sigma的牛胰岛素powder替代,唯一的考虑是powder必须用酸性溶液溶解(
dilute acetic or hydrochloric acid, pH 2-3),是否影响细胞生长?原来的牛胰岛
素溶液是现成的溶解在25mM HEPES,pH 8.2里面。
困扰两个月了,求教各位达人了。多谢多谢! |
W****7 发帖数: 426 | 2 盐酸不会影响你细胞生长的,他就是助溶的作用。稀释到你的培养基里就根本没有多少
了,如果你盐酸很多的话,培养基就变色了能看出来,只要颜色不变就不会影响细胞生
长。你还是找找你要的胰岛素。 |
W****7 发帖数: 426 | 3 我的bovine insulin就是自己配的,没什么问题,但是忘了从哪定的了,回去给你看看
吧。 |
w***e 发帖数: 269 | 4 问别的实验室借一些?胰岛素太常用太便宜了。这样的问题不要费心思了。 |
r**o 发帖数: 212 | 5 给ATCC打电话了,他们也用的是bovine提取的insulin。合成的人胰岛素不适用于我的
这个鼠细胞。
谢谢楼上的回复! |