l**********n
发帖数: 240 | 1 最近做lentivirus， 用293T包装，取病毒，离心，然后感染平滑肌细胞。
发现感染后 有的dish中有293T细胞（形态上很好辨认）。
有人告诉我可以用0.4um filter过滤可以去除293T细胞，但是病毒滴度会降低。
大家有没有更好的办法？ |
h***a
发帖数: 145 | |
d*p
发帖数: 534 | 3 商清收集以后，离心10分钟，2000rpm, 4.5um过滤, 超速离心。
我比较过4.5um过滤与不过滤上清，过滤不会降低滴度。 |
m*********7
发帖数: 5207 | 4 我以为过滤是standard practice呢。不过滤的东西我用着不放心。 |
l**********n
发帖数: 240 | 5 多谢！
你说的是0.45微米的filter 吧？
【在 d*p 的大作中提到】
: 商清收集以后，离心10分钟，2000rpm, 4.5um过滤, 超速离心。
: 我比较过4.5um过滤与不过滤上清，过滤不会降低滴度。
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w******a
发帖数: 1527 | 6 我都是用0.45微米的filter，效果很稳定。 |
d*p
发帖数: 534 | |
d****u
发帖数: 1553 | 8 不用那么麻烦吧，你把你的病毒放-80度冻一个晚上，293T就差不多死光了吧 |
n********k
发帖数: 2818 | 9 Spin is enough...although I never heard the 0.45 um would hurt the titer...0
.22 might...as the particle size of lenti is pretty close to that I believe.
..0.22 might be ok with retro if my memory is not wrong...
【在 l**********n 的大作中提到】
: 最近做lentivirus， 用293T包装，取病毒，离心，然后感染平滑肌细胞。
: 发现感染后 有的dish中有293T细胞（形态上很好辨认）。
: 有人告诉我可以用0.4um filter过滤可以去除293T细胞，但是病毒滴度会降低。
: 大家有没有更好的办法？
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n********k
发帖数: 2818 | 10 Btw, I wouldn't concentrate or freeze my production if working with cells
that use serum-containing medium, too much loss along the process and the
titer decreases with freezing...I used to do small virus production
everytime I need a new infection...take a bit planning but very easy and
reproducible...
【在 l**********n 的大作中提到】
: 最近做lentivirus， 用293T包装，取病毒，离心，然后感染平滑肌细胞。
: 发现感染后 有的dish中有293T细胞（形态上很好辨认）。
: 有人告诉我可以用0.4um filter过滤可以去除293T细胞，但是病毒滴度会降低。
: 大家有没有更好的办法？
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l**********n
发帖数: 240 | 11 Thanks a lot to the responses from you and all other people!
【在 n********k 的大作中提到】
: Btw, I wouldn't concentrate or freeze my production if working with cells
: that use serum-containing medium, too much loss along the process and the
: titer decreases with freezing...I used to do small virus production
: everytime I need a new infection...take a bit planning but very easy and
: reproducible...
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d*p
发帖数: 534 | 12 I guess he needs high titer, otherwise he could have simply used the viral
sup. |
