l**l 发帖数: 458 | 1 which one is better trizol, tri reagent, RNA bee?
Thank you! |
f*********r 发帖数: 1233 | 2 具体情况具体分析。
是从组织提还是从细胞提
给个样品里大约含多少rna
用途是什么:逆转录pcr,real-time pcr 还是superarray等
经费是否宽裕
对时间有无要求(耗费几小时甚至超过一天的方法是否能接受) |
H***e 发帖数: 223 | 3 我没有用过trizol,用过后两种,感觉tri-reagent比RNA bee效果好很多。
【在 l**l 的大作中提到】 : which one is better trizol, tri reagent, RNA bee? : Thank you!
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l**l 发帖数: 458 | 4 RNA from lung tissue
for Real-time PCR
Thank you for the answer. |
f*********r 发帖数: 1233 | 5 那就是说,样本来源比较丰富。这就比较好办。
trizol,白色/无色,忘了哪个公司的,不好。一是保存在4度会呈凝胶状。二是离心分
层的时候,界面不清晰。
trizol,粉红色,thermo。一般。有的时候rna沉淀是胶冻状,不太容易和杂质区分。
tri-reagent,粉红色,mrc。不错。技术熟练者可提到很多rna,而且纯度可以很高,
接近于2.0。要点是,不要贪多。每个样品不要太大块组织,够30-50微克的rna就好。
以上三者缺点是提纯步骤多,时间长。
rnazol,蓝色,mrc。不错。优点是一步提纯,如果不算酒精清洗这一步,半小时内可
完成。缺点是,纯度不如前者。1.8没问题,1.9以上就很少见了。
rna柱,qiagen。很不错。优点是可以很纯,大于2.0。缺点一是贵,二是对样品中rna
的量限制得比较严。多了不好,少了也不好。
rna bee没玩过,可参照上面老兄说的。
如果你做的real-time pcr比较稳定,引物特异性敏感性好,反应条件不严格(比如退
火温度,Mg离子浓度等),就没必要选rna提纯柱。如果是新手,可以先试试rnazol。
步骤简单易掌握,价钱不贵,现
【在 l**l 的大作中提到】 : RNA from lung tissue : for Real-time PCR : Thank you for the answer.
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l**l 发帖数: 458 | |