R*s 发帖数: 2041 | 1 ft. 你们用英文是讲不清楚了, 要不就是相互都没pay attention好好看。
GENESIS的意思是不管你用多少细胞,如果你的细胞好,antibiotics质量也好,
ligation做得也clean,那你negative control就应该很clean, 没什么clonie.
跟用了多少细胞没关系。同时ligation plates里应该有大量colonies而且
false positive的比例也应该很少。所以没必要降低细胞量。也没必要因为
clonies多而多做miniprep.
除非你切了后的vector超级sticky, 而且CIP不干净,
导致self-ligation很多(这句偶加的,呵呵)。
当然偶自己做cloning很烂,经常ligation plate才长一个,
一挑还真有insert. 哈哈,倒是省miniprep. |
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